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वीडियो: आप कॉलम क्रोमैटोग्राफी में एक नमूना कैसे लोड करते हैं?
2024 लेखक: Miles Stephen | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-15 23:36
कॉलम लोड करने के लिए:
- भंग नमूना विलायक की न्यूनतम मात्रा (5-10 बूँदें) में।
- एक मोटी सुई के साथ एक पिपेट या सिरिंज का उपयोग करके, ड्रिप करें नमूना सीधे सिलिका के शीर्ष पर।
- एक बार संपूर्ण नमूना जोड़ा गया है, अनुमति दें स्तंभ निकालने के लिए ताकि विलायक स्तर सिलिका के शीर्ष को छू ले।
इसके संबंध में आप एक कॉलम में कितनी सिलिका का प्रयोग करते हैं?
100g. के लिए एक अच्छी श्रेणी 100/20 से 100/10 (5 से 10 एमएल) एलुटेंट है सिलिका . यह एक अच्छा विचार नहीं है उपयोग यहां एक अलग विलायक - अलगाव गंभीर रूप से समझौता किया जाएगा।
दूसरे, फ्लैश कॉलम क्रोमैटोग्राफी कैसे काम करता है? फ्लैश क्रोमैटोग्राफी . पतली परत क्रोमैटोग्राफी प्रतिक्रियाओं की निगरानी, यौगिकों की शुद्धता की जांच करने और विलायक मिश्रण को अनुकूलित करने के लिए उपयोग किया जाता है कॉलम क्रोमैटोग्राफी . यह एक सूक्ष्म तकनीक है जिसमें बहुत कम मात्रा में यौगिक की आवश्यकता होती है।
इसके बाद, यह महत्वपूर्ण क्यों है कि स्तंभ चलाते समय स्थिर चरण को सूखने न दिया जाए?
दूसरे शब्दों में, अंदर का घोल स्तंभ कभी भी अनुमति नहीं दी जानी चाहिए सूखाना . यदि ऐसा होता है तो यह ठोस में दरारें और असमानता पैदा कर सकता है चरण , जो पृथक्करण की दक्षता को कम करेगा। अलग किए जाने वाले नमूने को एक उपयुक्त विलायक में घोल में लोड किया जाता है, अधिमानतः जितना संभव हो सके केंद्रित किया जाता है।
यदि स्तंभ सूख जाए तो क्या होगा?
अगर आपने जाने दिया स्तंभ सूखा सिलिका फटने लगेगी और आपको अपने यौगिकों का खराब पृथक्करण मिलेगा। जैसा कि आप Daud NS स्तंभ विलायक के स्तर को कभी भी सिलिका जेल के स्तर से नीचे न जाने दें अन्यथा आपको खराब परिणाम प्राप्त होंगे।
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कॉलम क्रोमैटोग्राफी और टीएलसी में क्या अंतर और समानता है?
इन दोनों के बीच मुख्य 'अंतर' यह है कि 'पतली परत क्रोमैटोग्राफी' कॉलम क्रोमैटोग्राफी की तुलना में एक अलग स्थिर चरण का उपयोग करती है। एक और अंतर यह है कि 'पतली परत क्रोमैटोग्राफी' का उपयोग गैर-वाष्पशील मिश्रणों को अलग करने के लिए किया जा सकता है जो कॉलम क्रोमैटोग्राफी में संभव नहीं है।'
आप जेल वैद्युतकणसंचलन कैसे लोड करते हैं?
नमूने लोड करना और अगारोज जेल चलाना: अपने प्रत्येक डीएनए नमूने में लोडिंग बफर जोड़ें। जम जाने के बाद, agarose जेल को जेल बॉक्स (वैद्युतकणसंचलन इकाई) में रखें। 1xTAE (या TBE) के साथ जेल बॉक्स भरें जब तक कि जेल कवर न हो जाए। जेल की पहली लेन में आणविक भार सीढ़ी को सावधानी से लोड करें
आप कॉलम क्रोमैटोग्राफी के लिए कॉलम कैसे पैक करते हैं?
एक (सिलिका जेल) कॉलम पैक करना: कॉलम के नीचे कपास का प्लग जोड़ने के लिए तार के एक टुकड़े का उपयोग करें। कॉलम को रिंग स्टैंड से जकड़ें और कॉलम के घुमावदार हिस्से को भरने के लिए पर्याप्त रेत डालें। टयूबिंग पर एक पिंच क्लैंप रखें, फिर कॉलम को 1/4 से 1/3 तक इंटियल एलुएंट से भरें
कॉलम क्रोमैटोग्राफी में कौन सा यौगिक सबसे पहले इल्यूट करता है?
एक कम-ध्रुवीय विलायक का उपयोग पहले कम-ध्रुवीय यौगिक को समाप्त करने के लिए किया जाता है। एक बार जब कम-ध्रुवीय यौगिक स्तंभ से हट जाता है, तो अधिक-ध्रुवीय यौगिक को समाप्त करने के लिए स्तंभ में एक अधिक-ध्रुवीय विलायक जोड़ा जाता है
कॉलम क्रोमैटोग्राफी के लिए सिलिका जेल कैसे तैयार किया जाता है?
कॉलम तैयार करना: सिलिका जेल का उपयुक्त सॉल्वेंट से घोल तैयार करें और धीरे से कॉलम में डालें। स्टॉप कॉक खोलें और कुछ विलायक को बाहर निकलने दें। विलायक की परत को हमेशा सोखना को कवर करना चाहिए; नहीं तो कॉलम में दरारें पड़ जाएंगी