क्या पीसीआर उत्पादों को शुद्ध करने के अन्य तरीके हैं?

2024 लेखक: Miles Stephen | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-15 23:36

उन अनुप्रयोगों के लिए जिनकी आवश्यकता है पीसीआर सफाई या सत्यापन पीसीआर परिणाम, वहां दो हैं तरीकों आम तौर पर पालन किया जाता है: पीसीआर उत्पाद एक कॉलम, और जेल का उपयोग करके अलगाव शुद्धिकरण एक agarose जेल से।

यहां, पीसीआर उत्पादों को शुद्ध करने के लिए किस प्रकार की क्रोमैटोग्राफी का उपयोग किया जाता है?

पीसीआर उत्पादों को शुद्ध करने के लिए, आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी का उपयोग किया जाता है। यह प्रोटीन जैसे छोटे अणुओं को फँसाता है, प्राइमरों , और न्यूक्लियोटाइड जबकि पीसीआर उत्पादों जैसे बड़े अणु मोतियों में प्रवेश करने और संग्रह ट्यूबों में कॉलम से गुजरने के लिए बहुत बड़े होते हैं।

इसके अलावा, आप डीएनए को कैसे शुद्ध करते हैं? मूल रूप से, आप कर सकते हैं शुद्ध आपका डीएनए सबसे उपयुक्त प्रक्रिया (यांत्रिक व्यवधान, रासायनिक उपचार या एंजाइमी पाचन) का उपयोग करके अपने सेल और/या ऊतक के नमूनों को lysating द्वारा नमूने, इसके संदूषकों से न्यूक्लिक एसिड को अलग करना और इसे एक उपयुक्त बफर समाधान में अवक्षेपित करना।

इसके अतिरिक्त, हम पीसीआर उत्पाद को शुद्ध क्यों करते हैं?

शुद्धिकरण a. से DNA का पीसीआर प्रतिक्रिया आमतौर पर डाउनस्ट्रीम उपयोग के लिए आवश्यक है, और एंजाइम, न्यूक्लियोटाइड, प्राइमर और बफर घटकों को हटाने की सुविधा प्रदान करती है। आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली विधियां सिलिका मैट्रिक्स वाले स्पिन कॉलम को नियोजित करती हैं जिससे डीएनए को कैओट्रोपिक लवण की उपस्थिति में चुनिंदा रूप से बाध्य किया जा सकता है।

डीएनए को साफ क्यों करना चाहिए?

हम साफ यूपी डीएनए बफर लवण, एंजाइम या अन्य पदार्थों को हटाने के लिए जलीय घोल से जो डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों को प्रभावित कर सकते हैं। उदाहरणों में शामिल हैं पीसीआर प्रतिक्रिया साफ यूपी, साफ ऊपर प्रतिबंध के बाद पचता है और साफ जीनोमिक या प्लास्मिड से ऊपर डीएनए सेलुलर प्रोटीन/मलबे से दूषित।