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वीडियो: आप अवशोषण से DNA की सांद्रता कैसे ज्ञात करते हैं?
2024 लेखक: Miles Stephen | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-15 23:36
डीएनए एकाग्रता को मापने के द्वारा अनुमान लगाया जाता है अवशोषण 260nm पर, A. को समायोजित करना260 मैलापन के लिए माप (द्वारा मापा गया अवशोषण 320nm पर), कमजोर पड़ने वाले कारक से गुणा करना, और उस संबंध का उपयोग करना जो A260 1.0 = 50 माइक्रोग्राम / एमएल शुद्ध डीएसडीएनए।
इसी तरह, लोग पूछते हैं, आप डीएनए की एकाग्रता का पता कैसे लगाते हैं?
मूल नमूने में डीएनए की सांद्रता निर्धारित करने के लिए, निम्नलिखित गणना करें:
- dsDNA सांद्रण = 50 μg/एमएल × आयुध डिपो260 × कमजोर पड़ने वाला कारक।
- dsDNA सांद्रता = 50 μg/एमएल × 0.65 × 50।
- dsDNA एकाग्रता = 1.63 मिलीग्राम/एमएल।
इसके अलावा, एक अच्छा डीएनए एकाग्रता क्या है? ए अच्छा गुणवत्ता डीएनए नमूने में A. होना चाहिए260/ए280 1.7-2.0 और ए. का अनुपात260/ए230 1.5 से अधिक का अनुपात, लेकिन चूंकि इन दूषित पदार्थों के लिए विभिन्न तकनीकों की संवेदनशीलता भिन्न होती है, इसलिए इन मूल्यों को केवल आपके नमूने की शुद्धता के लिए एक मार्गदर्शक के रूप में लिया जाना चाहिए।
इस तरह, डीएनए 280 एनएम पर अवशोषित होता है?
260. पर अवशोषण का अनुपात एनएम बनाम 280 एनएम है आमतौर पर आकलन करने के लिए प्रयोग किया जाता है डीएनए प्रोटीन समाधानों का संदूषण, चूंकि प्रोटीन (विशेष रूप से, सुगंधित अमीनो एसिड) सोख लेना पर प्रकाश 280 एनएम.
डीएनए एकाग्रता के लिए आप नैनोड्रॉप का उपयोग कैसे करते हैं?
मूल रूप से नैनोड्रॉप आपको चुनने का विकल्प देता है डीएनए , आरएनए, प्रोटीन। आपको चयन करने की आवश्यकता है डीएनए , फिर 2 L पानी रखें (मिली Q वरीयता) "रिक्त" चुनें, उसके बाद एक और 2 ΜL पानी रखें ताकि यह पुष्टि हो सके कि माप 0 है। फिर अपने नमूने का 2 L रखें। आपको माप मिल जाएगा।
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