वीडियो: एक बंधन को बदलने में कितना खर्च होता है?
2024 लेखक: Miles Stephen | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-15 23:36
परिवर्तन . 1-5 μl के बीच जोड़ें बंधाव सक्षम कोशिकाओं के लिए मिश्रण परिवर्तन . विस्तारित बंधाव खूंटी के साथ गिरावट का कारण बनता है परिवर्तन दक्षता (त्वरित बंधाव किट)। बड़े निर्माणों के लिए इलेक्ट्रोपोरेशन की सिफारिश की जाती है (>10,000 बीपी)।
इसके बाद, मुझे परिवर्तन के लिए कितने बंधाव उत्पाद की आवश्यकता है?
परिवर्तन . 1-5 μl के बीच जोड़ें बंधाव सक्षम कोशिकाओं के लिए मिश्रण परिवर्तन . विस्तारित बंधाव खूंटी के साथ गिरावट का कारण बनता है परिवर्तन दक्षता (त्वरित बंधाव किट)। बड़े निर्माणों (>10,000 बीपी) के लिए इलेक्ट्रोपोरेशन की सिफारिश की जाती है।
इसके बाद, प्रश्न यह है कि बंधाव और परिवर्तन क्या है? एक विशिष्ट क्लोनिंग प्रयोग में, शोधकर्ता पहले डीएनए का एक टुकड़ा, जैसे कि एक जीन, डीएनए के एक गोलाकार टुकड़े में डालते हैं जिसे प्लास्मिड कहा जाता है। यह चरण प्रतिबंध एंजाइम और डीएनए लिगेज का उपयोग करता है और इसे a. कहा जाता है बंधाव . एक के बाद बंधाव , अगला कदम डीएनए को बैक्टीरिया में स्थानांतरित करने के लिए एक प्रक्रिया है जिसे कहा जाता है परिवर्तन.
इसके बाद, कोई यह भी पूछ सकता है कि बंधाव के लिए कितने डीएनए की आवश्यकता है?
कुशल. के लिए वेक्टर + इंसर्ट की समग्र सांद्रता 1-10 g/ml के बीच होनी चाहिए बंधाव . वेक्टर: 1:1 और 1:10 के बीच दाढ़ अनुपात डालने की सिफारिश की जाती है (1:3 विशिष्ट है)। यदि आप अपने बारे में अनिश्चित हैं डीएनए सांद्रता, अलग-अलग अनुपातों के साथ कई लिगेशन करते हैं।
आप एक बंधाव प्रतिक्रिया को कितने समय तक संग्रहीत कर सकते हैं?
बंधन कर सकते हैं रात भर या कुछ दिनों के लिए कमरे के तापमान या कूलर (12-16 डिग्री सेल्सियस सोचें) पर किया जाना चाहिए, अगर तुम वास्तव में व्यस्त हैं। आप ऐसा कर सकते हैं भी एक बंधन स्टोर करें फ्रिज में और बाद में इसे कमरे के तापमान पर लिग करना जारी रखने के लिए बाहर निकालें लंबा जैसा आवश्यक हो।
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